Microscopía



El microscopio (del griego μικρός micrós, ‘pequeño’, y σκοπέω scopéo, ‘mirar’) es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. El tipo más común y el primero que se inventó es el microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico que contiene dos o más lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. La ciencia que investiga los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama microscopía. 
El microscopio fue inventado por Zacharias Janssen en 1590. En 1665 aparece en la obra de William Harvey sobre la circulación sanguínea al mirar al microscopio los capilares sanguíneos, y Robert Hooke publicó su obra Micrographia.
En 1665 Robert Hooke observó con un microscopio un delgado corte de corcho y notó que el material era poroso, en su conjunto, formaban cavidades poco profundas a modo de celditas a las que llamó células. Se trataba de la primera observación de células muertas. Unos años más tarde,Marcello Malpighi, anatomista y biólogo italiano, observo celulas vivas. 


Partes del microscopio 
Partes del microscopio


  • Ocular: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo.
  • Revolver: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos. 
  • Cabezal: contiene los sistemas de lentes oculares (monoculares o binoculares). 
  • Brazo: Es una pieza metálica de forma curvada que puede girar; sostiene por su extremo superior al Tubo Óptico y en el inferior lleva varias piezas importantes.
  • Platina: Lugar donde se deposita la preparación.
  • Objetivo: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta.
  • Pinzas de sujeción: Parte mecánica que sirve para sujetar la preparación. La mayoría de los microscopios modernos tienen las pinzas adosadas a un carro con dos tornillos, que permiten un avance longitudinal y  transversal de la preparación. 
  • Condensador: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación. El condensador de la parte de abajo también se llama foco y es el que dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
  • Tornillos de enfoque: Macrométrico que aproxima el enfoque y micrométrico que consigue el enfoque correcto.
  • Base: Sujeción de todo el microscopio.
  • Platina: Donde se coloca la muestra a observar.

Sistemas del microscopio

Mecánico

Estos elementos sostienen la parte óptica y de iluminación; además, permiten los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.

  • Base 
  • Estativo
  • Tornillo macrométrico
  • Tornillo micrométrico
  • Platina
  • Tornillo de ajuste de la platina
  • Tornillo del tope
  • Pinzas de la platina
  • Tornillo de centrado del condensador
  • Condensador
  • Tornillo del condensador
  • Carro
  • Tornillo del carro
  • Revolver

Iluminación

Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la preparación u objeto que se va a observar en el microscopio de la manera adecuada. Comprende los siguientes elementos:

  • Condensador
  • Lente auxiliar
  • Lente frontal
  • Diafragma iris
  • Lampara
  • Diafragma de campo

Óptico
Es el encargado de reproducir y aumentar las imágenes mediante el conjunto de lentes que lo componen. Está formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta una imagen de la muestra que el ocular luego amplía.

  • Oculares
  • Objetivos
  • Tubo óptico

Objetivos del microscopio



Los objetivos están considerados los elementos más importantes en la formación de la imagen microscópica, ya que estos sistemas de lentes establecen la calidad de la imagen en cuanto a su nitidez y la capacidad que tiene para captar los detalles de la misma (poder de resolución). Están constituidos también por un juego de lentes, en este caso, convergente y divergente, para eliminar, en la medida de lo posible, una serie de aberraciones que afectarían la calidad de las imágenes formadas. Las lentes se disponen dentro de un soporte o camiseta de metal, en cuyo exterior están inscritas una serie de anotaciones numéricas que indican, el aumento propio del objetivo, la apertura numérica, el tipo de material con que están tallados las lentes (de fluorita o semiapocromáticos) o la calidad que tendrán las imágenes, al anularse en la construcción de los objetivos, algunas aberraciones de las lentes (acromáticos, apocromáticos, aplanáticos etc.) o si se debe usar alguna sustancia de inmersión.
  
Los dos tipos de objetivos son:


  • Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparación. En la cara externa llevan una serie de índices que indican el aumento que producen, la abertura numérica y otros datos. Así, por ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es planacromático, su aumento 40 y su apertura numérica 0,65, calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El número de objetivos varía con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos más frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.
  • El objetivo de inmersión está compuesto por un complicado sistema de lentes. Para observar a través de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparación, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X y se distingue por uno o dos círculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior.

    El microscopio de nuestro laboratorio tiene los objetivos siguientes:


    • 4x identificado con el color rojo
    • 10x identificado con el color amarillo
    • 40x identificado con el color azul
    • 100x identificado con el color blanco

    Uso del microscopio



    1. Colocar el microscopio en una mesa que permita una cómoda observación a través del ocular.
    2. Limpiar el sistema óptico y el de iluminación.
    3. Subir el condensador hasta el tope y cerrar el diafragma iris, aproximadamente a la mitad.
    4. Seleccionar con el revolver el objetivo de menor aumento (10 X). Bajar la platina y colocar la preparación (fijarse que quede firmemente sujeta al carro, y que el cubreobjetos y el objeto estén situados hacia arriba) acomodando la porción de la preparación que se va examinar en la apertura.
    5. Mirando por los extremos subir la platina hasta el tope, si no hay tope acercar la platina lo más cerca posible a la lente objetiva, hasta apoyar lo levemente sobre la preparación. Normalmente los microscopios convencionales poseen un tope que impide su ascenso por arriba de cierta marca. Sin embargo, puede darse el caso que tal tope no exista. (este tope solo existe en la lente objetiva de 10X).
    6. Mirando por los oculares bajar la platina con el tornillo macrométrico, hasta que empiecen a distinguirse los detalles de la preparación.
    7. Afinar los detalles de la imagen moviendo el tornillo micrométrico.
    8. Ajustar la distancia interpupilar (distancia entre los ojos).
    9. Ajustar dioptrías (agudeza visual) en la porta ocular izquierda, o bien con el ocular enfocable izquierdo.
    10. Una vez conseguido el enfoque correcto, recorra toda la preparación, a fin de ir reconociendo imágenes que le sean familiares. recordar que el objetivo de 10X permite ver la visión panorámica del preparado. Es decir, los tejidos, su ubicación, y sus relaciones(función importante al inicio del estudio que ahorrará tiempo dedicado al análisis de la muestra).
    11. Cambiar a un objetivo de más aumento (sin bajar la platina con el tornillo macrométrico) y enfocar únicamente con el tornillo micrométrico.
    12. Para usar el objetivo de 100X, aleje la lente de la muestra, deposite una gota de aceite de inmersión en el portaobjetos (sin quitar la laminilla de la platina) en el punto de mayor concentración luminosa, acerque la lente de 100X lentamente hasta que esta se encuentre en contacto con el aceite (observar lateralmente éste movimiento). Observe por el ocular y mueva ligeramente el tornillo micrométrico hasta encontrar la imagen.
    13. Recordar que los objetivos de 40X y 100X, permiten ver detalles de una célula, o la conformación celular de una estructura. Se puede observar la forma y tamaño de células o grupo de ellas, aspecto que permite analizar la muestra de manera eficiente.

    14. Al finalizar su observación, apague la fuente de luz, colocar la lente de menor aumento. Aleje la platina del objetivo. Retire la laminilla y limpie las lentes objetivas y la platina.



    Aqui les comparto algunas actividades del tema





    1 comentario: